近年来工业活动、城市垃圾、大气沉降以及农业生产中化肥农药的施用使得受重金属污染的耕地面积大量增加，全国受污染的土壤总的超标率为16.1%，其中Cd污染的点位超标率达到7.0%^[1]。Cd是对作物有较高毒性的元素之一，且在土壤和植株中较易迁移，不仅危害植物的生长和发育，也会直接或者间接地通过食物链对人类健康造成重大危害。水稻（Oryza sativa L.）是我国重要的粮食作物，潘根兴等^[2]对华东、华北、华中、西南等6地区县级以上市场的170多种大米样品进行了随机采购和数据分析，结果发现有10%的样品Cd超标。因此研究Cd污染土壤水稻体系中Cd的积累和转移规律对水稻的安全生产具有重要的理论指导意义。

目前改良重金属污染土壤最主要的措施之一是施用改良剂，降低其在土壤中的活性，进而减少其在植物体内的积累^[3]。现有的研究表明，硅是水稻生长发育过程吸收较多的元素之一，不仅能够促进水稻正常的生长发育，提高作物产量和改善籽粒品质，而且能够提高水稻的抗逆性^[4-5]。大量研究表明，硅能够缓解重金属对水稻的毒害效应^[6-7]。Liang等^[8]认为，施硅后水稻根部所吸收的Cd向地上部分迁移的量明显减少。张世浩^[9]研究发现，不同施硅量和施硅时期对水稻体内Cd吸收、积累与分配有一定影响，并认为拔节期施硅对稻米Cd积累有着明显的缓解作用。再者，不同时期施硅对水稻群体生长和产量影响也不同^[4]。因此可以推测不同生育期施硅对水稻Cd的累积与分配有可能存在不同影响。此外，重金属的活动性、生物有效性及毒害性等取决于它们在土壤中的化学形态^[10-12]。硅能够改变土壤中重金属的形态，降低其在土壤中生物有效性，从而抑制水稻对Cd的吸收、减少Cd向地上部运输^[13-14]。

本文为了进一步探讨硅素施用时期对稻米Cd积累影响，在施硅总量不变的基础上，设置硅素分期施用3种方法，研究其对土壤各形态Cd含量与稻株内Cd的累积、迁移与分配的影响规律。其结果可作为指导生产实践中受Cd污染的稻田硅素施用的理论依据，对降低稻米Cd含量、促进水稻的安全优质生产有着重要的理论和实践意义。

试验于2016年7月至2016年11月在农业部华南热带农业环境重点实验室实验基地（23.21°N，113.42°E）温室大棚进行。以广东地区大面积推广品种黄华占为材料，供试土壤取自华南农业大学跃进南稻田耕作层0~30 cm土壤，供试土壤的基本理化性状如下：有机质24.74 g·kg^-1，全氮1.05 g·kg^-1，全磷1.38 g·kg^-1，全钾22.0 g·kg^-1，全镉低于检测线。

水稻盆栽实验使用无盖的圆柱形黑色塑料桶（20 cm×28 cm×17 cm），人工添加外源Cd（CdCl₂·2.5 H₂O）模拟含Cd为100 mg·kg^-1的污染土壤，每盆装污染土5 kg。根据张世浩^[9] “100 mg·kg^-1的Cd污染土壤中加入56 mg·kg^-1 Si效果显著”的研究结果，在总施硅量（硅酸钾56 mg·kg^-1土壤，K₂SiO₃·5H₂O）不变的基础上，设置3种施硅方式，分别是基施硅素（C1）：移栽前加入5 L 2 mmol· L^-1硅溶液；基肥和拔节期施硅素1:1分期施用（C2）：移栽前和拔节期各施用2.5 L 2 mmol· L^-1硅溶液；拔节期施硅素（C3）：拔节期施用5 L 2 mmol· L^-1硅溶液。以不施硅（CK）为对照。每个处理种植10盆，共40盆。挑选长势均一的秧苗进行移栽，每盆3穴，每穴1株。为保证实验过程中水稻正常生长，在水稻移栽前每盆施用尿素3 g、磷酸氢二钾1 g用作基肥，生育期间根据长势补充上述基肥。用硝酸调节硅酸钾溶液pH值至7。在整个试验期间，盆钵置于通风玻璃温室内，用实验基地安装的自来水进行灌溉，每日下午5点，用500 mL塑料烧杯进行浇灌，使种植水稻的盆内水层保持1~2 cm。

于水稻抽穗期和成熟期各取5盆水稻，分别按地上部和地下部收获，分根、茎、叶、穗四部分（抽穗期的穗和茎混在一起），将根、茎、叶于110 ℃烘箱中杀青30 min，转入70 ℃下烘干至恒重，用万分之一天平（Sartorius AG，德国生产）称重。成熟期的穗部自然风干，并对每盆穗数、每穗实粒数、每穗空粒数、千粒重、结实率、产量进行分析。

于水稻抽穗期和成熟期，各取5盆水稻土，每盆选取三个等距离的点用取土器取20 cm土，并将三个点的土样混合在一起。土样放在阴凉处风干、待测。

土壤pH值参考鲍士旦^[15]的方法测定。

土壤Cd含量测定方法：准确称取0.15 g过100目筛的风干待测土壤于聚四氟乙烯消解管中，加入消解液[V（HNO₃）:V（HF）=4:1]10 mL，盖上密封盖，放入微波消解仪（CEM）进行消解，消解结束后将液体倒入25 mL小烧杯中于电热板上加热将酸挥发干，在赶酸过程中可适当加入1 mL H₂O₂使反应更加充分；冷却后用去离子水洗涤转入50 mL容量瓶中定容；将样品转移到50 mL塑料瓶中，用火焰原子吸收仪（德国耶拿ZEEnit^® 700P）测定土壤Cd含量。

土壤中Cd各个形态的含量按照吕兑安^[16]改进的BCR连续提取法进行提取。

参考鲍士旦^[15]的方法。

数据统计与分析均采用SPSS 18.0显著性F测验和Duncan多重比较法（P < 0.05和P < 0.01），图形采用Origin 8.0进行绘制。

式中：c为该物质中Cd含量，mg·kg^-1；m为该物质的质量，kg。

对水稻生物量的影响如表 1所示。硅素分期施用对抽穗期水稻茎、叶干质量的影响并不显著，但是C1根的生物量较CK显著增加。成熟期根、茎、叶以及籽粒干质量受硅素分期施用的影响较大，C1的籽粒干质量较CK增加11.0 %（P < 0.05）；C2处理的茎和籽粒干质量较CK分别增加25.2%（P < 0.05）、27.7%（P < 0.05）；C3处理的根和茎的干质量较CK分别增加33.2%（P < 0.05）、16.4%（P < 0.05）。与CK相比，C1、C2、C3施硅处理成熟期地上部干质量的增幅分别是9.6%（P < 0.05）、13.5%（P < 0.05）、11.1%（P < 0.05）。这说明在100 mg·kg^-1 Cd污染土壤中施硅有利于稻株生长，利于干物质积累，提高稻株生物量，C2表现尤为明显。

表 1 硅素分期施用对Cd污染土壤中水稻生物量的影响（g·盆^-1） Table 1 Effects of split silicon application on biomass of rice in the soil polluted with cadmium(g·pot^-1)

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由表 2可知，硅素分期施用对水稻千粒重、结实率以及每穗空粒数有一定影响，但对每穗实粒数影响不大。与CK相比，3种硅素施用处理的水稻千粒重（C1除外）和结实率均显著增加，而每穗空粒数则显著降低。与CK相比，C1、C2、C3千粒重和结实率的增幅分别达到3.7%、7.2%（P < 0.05）、6.2%（P < 0.05）和19.9%（P < 0.05）、23.2%（P < 0.05）、31.6%（P < 0.05）。

表 2 硅素分期施用对Cd污染土壤下水稻产量构成因素的影响 Table 2 Effects of split silicon application on yield factors of rice planted in cadmium polluted soil

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水稻抽穗期各个处理土壤Cd含量无显著差异（表 3），而成熟期C2和C3的土壤Cd含量显著高于CK，这说明拔节期施硅可有效地阻止土壤中Cd向水稻植株中转移，使滞留在土壤中的Cd明显增加。此外，施硅降低灌浆结实阶段土壤Cd迁出率。与CK相比，各施硅处理灌浆结实阶段土壤Cd迁出率的降幅分别为18.1%、67.0%（P < 0.05）、53.3%（P < 0.05）。这说明从抽穗到成熟这一阶段，即水稻籽粒灌浆期，CK土壤中仍有较多的Cd向水稻植株中转移，而施用硅素可以阻碍土壤Cd向稻株中迁移，使其滞留在土壤中，尤其是拔节期施硅，可明显使更多的Cd滞留在土壤中。

表 3 硅素分期施用对抽穗期和成熟期土壤Cd含量及其迁出率的影响 Table 3 Effects of split silicon application on Cd content of soil at heading and mature stage

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由图 1可知，3种施硅处理对水稻抽穗期土壤可交换态和残渣态Cd含量无显著影响，但显著降低了成熟期土壤可交换态Cd含量、提高了残渣态Cd含量。

图 1 硅素分期施用对土壤中可还原态Cd（A）、可交换态Cd（B）、可氧化态Cd（C）以及残渣态Cd（D）含量的影响 Figure 1 Effects of split silicon application on the contents of reducible Cd(A), exchangeable Cd(B), oxidizable Cd(C) and residual Cd(D)in soil

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土壤中可还原态和可氧化态Cd的含量也受到硅素分期施用的影响。抽穗期，C1和C2处理还原态Cd含量显著低于CK和C3，然而，土壤可氧化态Cd含量却高于CK和C3；成熟期3种施硅处理的土壤可还原态Cd含量显著低于CK，而土壤可氧化态Cd含量却高于CK，其中C2含量显著高于C1。由此可知，基施硅素C1有利于水稻生长前期土壤可还原态Cd含量降低和可氧化态Cd含量的增加，而基肥和拔节期硅素1:1分期施用处理C2对提高水稻生长后期土壤可氧化态Cd含量有利，而且C2这种基肥与拔节期分期施用硅素更利于整个生育期土壤可氧化态Cd含量增加和土壤可还原态Cd含量的减少。

由图 2、图 3可知，土壤中各形态Cd含量的比例明显受硅素分期施用的影响，施硅处理的成熟期土壤中残渣态Cd的比例增加，而可交换态Cd的比例明显降低。与CK相比，成熟期C1、C2、C3处理残渣态Cd的比例分别上升了50.7%、77.9%、82.5%，而可交换态Cd的比例分别降低了19.8%、34.5%、37.0%（图 3）。这说明拔节期施硅显著影响了水稻灌浆结实期间土壤中Cd的形态，从而影响这一时间Cd从土壤向稻株的转移，使土壤中滞留更多的残渣态Cd和可氧化态Cd，从而减少了相对活跃的可交换态和可还原态Cd含量。

图 2 硅素分期施用对水稻抽穗期土壤中各形态Cd分配比例的影响 Figure 2 Effects of split silicon application on cadmium distribution ratios of all fractions in soil at heading stage of rice

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图 3 硅素分期施用对水稻成熟期土壤中各形态Cd分配比例的影响 Figure 3 Effects of split silicon application on cadmium distribution ratios of all fractions in soil at mature stag

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由表 4可知，硅素分期施用对水稻抽穗期和成熟期各器官Cd含量均有一定的影响。抽穗期，C1和C2的茎和叶Cd含量与CK、C3相比显著降低，而C2和C3根中Cd含量显著升高；成熟期，施硅处理的根和糊粉层中Cd含量增加，而茎、叶和精米中的Cd含量显著降低，C1、C2和C3精米的Cd含量与CK相比分别降低了13.8%（P < 0.05）、35.1%（P < 0.05）、27.9%（P < 0.05）。

表 4 硅素分期施用对Cd污染土壤下水稻各器官Cd含量的影响（mg·kg^-1） Table 4 Effects of split silicon application on Cd contents of different rice organs in cadmium polluted soil(mg·kg^-1)

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由表 5可知，抽穗期，C2、C3根中Cd累积量显著高于CK，而其茎、叶中Cd累积量与CK相比无显著差异。但从单盆稻株Cd累积量来看，C2单盆稻株Cd累积量显著高于CK。成熟期，3种施硅处理的根和谷壳（除C1外）中Cd累积量较CK而言均有所增加。与CK相比，C1、C2和C3精米中Cd累积量分别降低了21%、27%（P < 0.05）、34%（P < 0.05）。值得注意的是C2和C3处理，其根中Cd累积量较高，导致成熟期单盆稻株Cd累积量显著高于CK和C1处理。

表 5 硅素分期施用对Cd污染土壤下水稻各器官Cd累积量的影响（mg·盆^-1） Table 5 Effects of split silicon application on Cd accumulations in different organs of rice in cadmium polluted soil(mg·pot^-1)

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由表 6可知，水稻抽穗期和成熟期各器官Cd富集系数明显受到硅素分期施用的影响。抽穗期，C2和C3根的Cd富集系数较CK显著增加，而C1和C2的茎、叶Cd富集系数显著降低；成熟期，C2和C3根的Cd富集系数较CK分别增加27.7%（P < 0.05）、34.6%（P < 0.05），而茎和叶的Cd富集系数显著降低。施硅各处理精米的Cd富集系数差异显著，CK富集系数最高，其次是C1，C2和C3较低。谷壳和糊粉层的Cd富集系数在各个处理之间均未表现出显著性差异。

表 6 硅素分期施用对Cd污染土壤下水稻各器官Cd富集系数的影响 Table 6 Effects of split silicon application on bioconcentration enrichment factor(BEF)of Cd in different organs in cadmium polluted soil

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由表 7可知，抽穗期C1、C2水稻茎的Cd转移系数较CK分别降低了41.2%（P < 0.05）、52.9%（P < 0.05），抽穗期C1、C2、C3叶片的Cd转移系数均低于CK，降幅分别为33.3%（P < 0.05）、45.2%（P < 0.05）、28.6%（P < 0.05）；成熟期各施硅处理茎、叶、谷壳以及精米的Cd转移系数均显著低于CK，C2和C3转运系数达到最低。

表 7 硅素分期施用对Cd污染土壤下水稻各器官Cd转移系数的影响 Table 7 Effect of split silicon application on transfer factor in different organs in cadmium polluted soil

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由图 4可知，硅素可显著提高污染土壤pH值。抽穗期C1处理土壤pH值显著高于其他处理，这一点可能与本试验C1处理的硅全部在移栽前施用有关；而随着生育进程的推进和拔节期硅素的施用，成熟期C2、C3处理土壤的pH值显著上升，但3种施硅处理之间无显著差异。

图 4 分期施用硅素对土壤pH值的影响 Figure 4 Effects of split silicon application on pH value of soil

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由表 8可知，水稻根中Cd的累积量与土壤可交换态和可还原态Cd含量呈显著负相关，与残渣态以及可氧化态呈显著正相关，而精米中Cd的累积量与土壤各形态Cd含量的相关性正好相反，精米中Cd累积量与土壤可交换态和可还原态Cd含量呈显著正相关，与残渣态和可氧化态呈显著负相关。其他器官茎、叶、谷壳、糊粉层中Cd累积量与土壤各形态Cd含量无显著性相关关系。

表 8 成熟期土壤各形态Cd含量（mg·kg^-1）和水稻各器官Cd累积量（mg）之间的相关关系（n=12） Table 8 Correlation between Cd speciation in soil (mg·kg^-1)and Cd accumulations (mg)in different organs of rice at mature stage(n=12)

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研究表明，施硅对水稻有一定的增产作用^[17-19]。宋合林等^[20]研究表明，不同生育时期施用硅肥对水稻生长发育均有良好的作用，增产效果较为明显，尤以拔节前追施硅肥效果为最佳，增产幅度达到10.5%。张国良等^[21]研究结果表明，不同时期施用硅肥均可通过提高水稻的结实率、增加每穗实粒数、提高千粒重来增加水稻产量。本研究结果表明，在100 mg·kg^-1的Cd污染水平下，基肥和拔节期硅素1:1分期施用处理C2以及拔节期施硅C3能够增加水稻根、茎和籽粒的干质量。同时也增加水稻的千粒重和结实率，降低每穗空粒数，这与周青等^{[4, 22]}发现拔节期前施硅可增加水稻每穗结实粒数的结果一致；但C2比C3更能够有效提高成熟期水稻地上部干质量，其原因可能是硅素分期施用更有利于水稻的前期营养生长以及后期的生殖生长，硅在整个水稻生育期均起到作用。

本试验条件下，抽穗期C1和C2处理茎和叶中的Cd含量显著降低，但C2根中Cd含量及累积量却显著增加，这说明基施硅素有利于减少水稻从移栽到抽穗期阶段地上部茎和叶中Cd的累积，使吸收的Cd积累在根中。成熟期，3种施硅处理茎、叶和精米中Cd的含量均明显降低，尤其是C2和C3中精米Cd含量达到最低，且C2和C3精米中Cd累积量也达到最低；但却显著增加了C2和C3根、糊粉层Cd的含量。由此可知，在总施硅量不变的基础上，拔节期施硅可抑制根中Cd向地上部及籽粒中的转移，从而使Cd滞留在根部，表现为施硅显著增加了根对Cd吸收，提高了根对Cd的富集能力（表 6）。而C2分期施用硅素不仅有利于抽穗前根中Cd累积，抑制Cd从根向地上部茎叶中转运，而且也利于降低精米中Cd积累。

抽穗期C1和C2根中Cd富集系数增加，而茎、叶中Cd富集系数显著降低，这说明基施硅素可促进抽穗前水稻根对Cd的富集，并对茎叶的Cd富集起到抑制作用。到成熟期施硅对根、茎、叶的Cd富集能力仍有显著影响，这与抽穗期表现基本一致。此结果与史新慧等^{[17, 23]}水培试验研究结果一致。抽穗期水稻C1和C2茎、叶中Cd转移系数显著降低，而到成熟期C2和C3茎叶的Cd转移系数明显下降，表明从抽穗到成熟这一生育阶段，C2、C3两处理从土壤中吸收的Cd大部分都累积在根部，从根向地上部转移的Cd受到抑制，从而降低茎、叶、精米中Cd含量。

上述结果说明基施硅素可抑制Cd在移栽到抽穗这一阶段从根中向水稻茎叶中转移，而对于基肥和拔节期硅素1:1分期施用处理C2而言，其不仅可以影响Cd在移栽到抽穗这一生育阶段从根中向地上部的转移，而且可以明显抑制灌浆结实阶段Cd向精米中的转移。

现有研究认为Tessier法中前三种形态（可交换态、碳酸盐结合态、铁锰氧化物结合态）和BCR中前两种形态（可交换态、可还原态）进入环境后容易迁移转化，为生物可利用形态^[16]。本研究表明，成熟期C2和C3土壤Cd含量显著高于CK；施硅能显著降低成熟期水稻土壤可交换态Cd以及可还原态Cd的含量，使土壤残渣态Cd含量明显增加。同时本研究发现，土壤各形态Cd含量与水稻根和精米中Cd累积量有着显著性相关关系。这说明拔节期施硅显著影响了水稻灌浆结实期间土壤中Cd的形态，从而影响这一时间段Cd从土壤向稻株的转移，使土壤中滞留更多残渣态Cd和可氧化态Cd，从而减少了相对活跃的可交换态和可还原态Cd含量，进而精米中Cd累积量也显著降低。

土壤pH往往被认为是影响重金属Cd活性的因素之一，土壤pH值越高土壤中重金属Cd的活性越低^[24]。这是因为，土壤pH值的改变可导致土壤中重金属化学形态发生变化，当土壤pH值达到一定程度后重金属Cd与硅相互作用产生了沉淀。本试验施硅处理显著提高了抽穗期、成熟期土壤pH值，施硅后土壤中的残渣态Cd显著增加，即有效态Cd含量降低。

（1）施硅能有效提高成熟期水稻地上部各器官干重，降低精米中Cd的含量、累积量以及富集系数。C2和C3处理均可显著降低成熟期水稻土壤中可交换态Cd和可还原态Cd，提高土壤中残渣态Cd和可氧化态Cd，同时使水稻植株吸收的Cd大量滞留在根部，抑制Cd从根向地上部各器官的迁移，使根中Cd累积量明显增加。

（2）综观各处理水稻的产量构成及各器官与土壤Cd含量，C2更利于整个生育期土壤可还原态Cd含量的减少，促进水稻抽穗前生长发育，使更多的Cd滞留在土壤中，吸收的Cd积淀在根部。值得提出的是，因本试验对移栽前（基肥）和拔节期硅素分期施用的配比只用了一种，对于其他施用配比还有待进一步研究。