通过改良EDC法，将2，4-DB、2，4-D分别与载体蛋白（BSA、OVA）偶联合成了2，4-D的免疫原2，4-DB-BSA、2，4-D-BSA和包被原2，4-DB-OVA、2，4-D-OVA。免疫抗原测定结果表明，所得紫外吸收光谱，具有载体蛋白BSA和半抗原2，4-DB或2，4-D的特性，最大吸收峰为282 nm。合成2，4-DB-BSA、2，4-D-BSA免疫抗原的结合比分别为1∶24、1∶20，合成的2，4-DB-OVA、2，4-D-OVA包被原的结合比分别为1∶10、1∶8。上述两种免疫原分别免疫新西兰白雄兔，获得2，4-D类农药多克隆抗体。其中免疫2，4-DB-BSA的两只兔PBD1和PBD2的效价较高，分别是1∶102 400和1∶51 200。选择效价较高的PBD1多克隆抗体进一步优化筛选出抗原抗体的工作浓度，2，4-D-OVA包被原3 μg·mL-1，PBD1多克隆抗体1∶12 800。经测定，该多克隆抗体对目标检测物2，4-D、2，4-D butyl ester敏感度较高，抑制中浓度（I50）、检测限（I20）分别为，2，4-D：179.8 ng·mL-1，1.09 ng·mL-1；2，4-D butyl ester：3 010.0 ng·mL-1，1.53 ng·mL-1。对2，4-D识别的特异性也较强。另外测定了制备2，4-D多克隆抗体对几种2，4-D类似结构化合物交叉特异性反应，2，4-DB最强，2，4-D次之，之后依次